iptg怎么配 IPTG怎么配置
1、iptg就是异丙基bated硫代半乳糖吡喃糖苷,是iptg诱导剂,cas367931@002853,可以用水或者甲醇溶解配备溶液,注意要低温20度;一般是配好的amp+LB板,涂板的时候把xgal 40ul20mgml,IPTG 4ul200mgml加入到菌液里,然后混匀涂板也可以先涂到板上在涂菌配培养基的时候,一般不直接加xgal,IPTG,确实存在浪费问题,因为菌只。
2、IPTG不被菌体代谢,为乳糖类似物,一旦进入细胞就会产生持续长久的诱导效果,所以IPTG的诱导效率高,往往只需要很少量1mmolL即可达到理想诱导效果由于IPTG不被代谢,在胞内专一诱导外源蛋白的表达不受细胞代谢的影响;先配置普通的LB培养基,然后高压灭菌后,让培养基冷却到60度左右,加入合适的抗生素AMP等,接着倒平板然后配置20mgml的X-gal用二甲基甲酰胺溶解和200mgml的IPTG水溶在做蓝白筛选前,在平板上加入40ul;需要搭配Xgal来用,IPTG为安慰型诱导物,可诱导β半乳糖苷酶的产生,Xgal是β半乳糖苷酶的作用底物,在β半乳糖苷酶的作用下Xgal被切割成半乳糖和深蓝色的物质,这样就能看到蓝色,如果lac启动子的质粒中插入了。
3、取1g IPTG溶于5ml双蒸水中,022μm微孔滤膜过滤除菌,20°C保存即可;iptg的1mmoll其实就是11000,如果你有5ml的菌液,就加5ul的iptg 05m,就是05moll。
4、IPTG是为了诱导乳糖分解相关酶的编码基因表达,使得培养基中的乳糖得以被分解产生半乳糖Xgal一种酵母半乳糖苷酶显色底物,可以与分解产生的半乳糖结合生成蓝色物质,用于蓝白斑筛选;20%wv的IPTG含义 一含义解释 1 IPTG异丙基βD硫代吡喃半乳糖苷 商品名称 Isopropyl βD1Thiogalactopyranoside 英文简称 IPTG 2 20%wvIPTG溶液 20%, mV配方,上海江莱提供的生物。
5、最简单的办法 取200ul菌,离心去上清,在菌体里加入50ul 2%SDS,再加入16ul 4X loading buffer,煮上五分钟即可以上样 用超声的办法太麻烦了,特别是菌体比较少的情况;重组质粒转化到合适的菌株中JM109, DH5α,然后涂布到含05mMIPTG, 40ugmlXGal指示平板上可将50ul的XGal和100 ulIPTG贮液直接加入到平板中,扩散到整个平板中,在37oC保温30分钟使液体扩散IPTG溶于水中;我在生物帮那儿帮你找到了Xgal和IPTG溶液配制方法,你看下吧Xgal溶液配制方法Xgal为5溴4氯3吲哚βD半乳糖苷用二基甲酰胺溶解Xgal配制成的20mgml的贮存液保存于一玻璃管或聚丙烯管中,装有Xgal;把IPTG配制成2383 mgml100 mM的水溶液,并进行过滤除菌后保存然后在100 ml的琼脂培养基中,加入100 μl的上述溶液200 μl的XGal20 mgml的二甲基甲酰胺DMF溶液和100 μl的Amp100 mgml,制。
6、如果你有5ml的菌液,就加05uL的IPTG。